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突破限制的流式细胞技术
时间:2015-06-11 11:43:30  作者:网站编辑  来源:生物通
最初作为一种免疫学和细胞生物学研究工具的流式细胞技术,在经过几十年的洗礼之后,已经愈发强大,能帮助使用者们进行单个细胞内多种分子和物理特征的归类

  最初作为一种免疫学和细胞生物学研究工具的流式细胞技术,在经过几十年的洗礼之后,已经愈发强大,能帮助使用者们进行单个细胞内多种分子和物理特征的归类,而相关的荧光激活细胞分选仪(fluorescence-activated cell sorter,FACS)则更是能帮助研究人员从异质的多种细胞中筛选出特殊细胞来。

  这些设备工具对生物学研究产生了深远的影响,但是它们还是存在一些局限性,比如有时这些技术只能基于蛋白含量来计数或分选细胞。因此要利用这些方法识别包含特殊突变的细胞,并不容易。而且研究人员也需要事先知晓他们寻找的是什么分子,才能用于荧光标记抗体靶向靶标。同时由于流式细胞技术也取决于表面受体结合的抗体,因此总是存在实验本身激活或改变分析细胞的可能性。

  “在大部分情况下,如果你的亲和检测过程没问题,也就是抗体或低聚物探针能特异性的标识靶细胞类型,那么流式细胞仪还是很好用的,”加州大学旧金山分校助理教授Adam Abate说,“而这实际上并不是我们经常想要做的方向。”

  因此近年来,科学家们研发出了一些新的策略,但他们并没有修改传统的流式细胞仪,而是在新型微流控装置上进行精简。这些微型芯片实验室能帮助研究人员在更为多样的物理和分子特征基础上进行筛选和分型,而且也不需要抗体。以下是几位学者提出的新型流失细胞技术与研究策略。

  磁计数

  来自哈佛医学院放射科的助理教授Hakho Lee等人研发出了一种高灵敏的新型全血内稀有细胞检测技术,这种技术的独特性在于具有磁化特性和生物正交化学特性的磁性纳米粒子,非常适合在临床实践中进行稀有细胞的分子和细胞诊断。

  检测稀有细胞(<100个细胞/毫升全血),并对单细胞特异性标志物进行定量测量的能力在基础生物医学研究中日益重要。然而,细胞密度低,样本量小,以及需要对样品进行必要的净化等限制因素阻碍了这种方法在临床的广泛使用。

  为了克服这些挑战,Lee等人构建了一个以微量流体芯片为基础的微型霍尔探测器(μHD),它可以在全血中直接测量单个的,免疫磁性标记细胞。 μHD甚至可以在广大的血细胞和未结合反应物存在下,检测单个细胞,而不需要任何清洗或纯化步骤。

  此外,用于μHD的半导体技术具有高灵敏度和测量的广谱性。这使它可以进行高通量的筛选(目前约1千万个细胞/分钟)。对20个卵巢癌患者全血使用μHD芯片检测循环肿瘤细胞证明,该方法的灵敏度远高于目前临床标准的要求。

关键字:流式,细胞技术
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