体外构建干细胞汗腺细胞融合体的初步研究

　　白求恩国际和平医院的杨建民, 刘坤坤, 刘超, 贾玉磊, 王更银, 李俊峡, 王鹏, 史少蕊, 组成的研究小组介绍了体外构建干细胞汗腺细胞融合体的初步研究。

　　研究脐带间充质干细胞(UCMSC)和人汗腺细胞(SGC)合核细胞的生物学特性，为汗腺再生探索新的方法和途径。

　　方法 (1)体外分离培养UCMSC和SGC，通过检测CD14、CD44、CD29、CD105、CD34、CD45表达情况鉴定UCMSC，检测CK19、CEA表达情况鉴定SGC。(2)制取、检测间充质干细胞/汗腺细胞合核细胞，用PKH26、CFSE分别对UCMSC、SGC进行标记，用聚乙二醇(PEG)化学融合法制备间充质干细胞/汗腺细胞融合体，通过荧光显微镜荧光观察筛选融合细胞后继续培养;1周后流式细胞仪检测合核细胞中CD14、CD44、CD29、CD105、CD34、CD45表达率，免疫组织化学检测CK19、CEA表达情况。

　　结果间充质干细胞/汗腺细合核细胞的免疫组化检测CEA和CK19表面抗原均为阳性，流式细胞术检测表面标志物CD29、CD44、CD105表达率较高。

　　诱导融合后的间充质干细胞/汗腺细胞合核细胞同时具备干细胞和汗腺细胞的表型。

　　人脂肪间充质干细胞与脐静脉内皮细胞共培养与丝素蛋白支架联合构建组织工程脂肪的体外研究

　　兰州军区兰州总医院全军烧伤整形中心的刘刚强介绍了他与张诚,刘毅,亢婷,王刚的研究小组正在进行的人脂肪间充质干细胞与脐静脉内皮细胞共培养与丝素蛋白支架联合构建组织工程脂肪的体外研究的进展。

　　人脂肪间充质干细胞(hADSCs)与脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养后，与丝素蛋白支架联合构建组织工程脂肪的可行性。

　　从人体正常脂肪组织中提取脂肪间充质干细胞，培养并扩增;行成脂及成骨诱导鉴定脂肪间充质干细胞的多向分化特性，流式细胞仪检测细胞表面分子CD34、CD44、CD45、CD90;脐静脉内皮细胞表面分子CD31及CD34测定;人脂肪间充质干细胞与脐静脉内皮细胞增殖曲线的测定、共培养比例的探皮细讨;将共培养体系种植于丝素蛋白支架后行电镜扫描;成脂诱导14天后，RT-PCR鉴定成脂基因PPAR的表达。

　　人脂肪间充质干细胞经鉴定，可以向脂肪细胞及成骨细胞分化，流失细胞术结果显示CD34(+)，CD44(+)，CD45(-)，CD90(-);脐静脉内皮细胞CD31(+)，CD34弱阳性;脐静脉内皮细胞增殖速度快于人脂肪间充质干细胞，以HUVEC:ADSCs为1:4比例接种于培养皿内3天后，细胞融合时两者比例约为1:1;接种于丝素蛋白支架，成脂诱导14天后，通过RT-PCR可成功测定出PPAR2基因的表达。人脂肪间充质干细胞与脐静脉内皮细胞共培养，在体外可成功构建出血管化工程脂肪。